磁珠法活化T細(xì)胞的原理簡(jiǎn)介——BeaverBeads? Streptavidin 5μm(Cat. 22306)
T淋巴細(xì)胞(T lymphocyte)作為適應(yīng)性免疫應(yīng)答中的核心,它們不僅介導(dǎo)適應(yīng)性細(xì)胞免疫應(yīng)答,在胸腺依賴性抗原誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答中亦發(fā)揮著重要的輔助作用。T細(xì)胞分化發(fā)育相當(dāng)復(fù)雜,又在體內(nèi)不斷更新,在同一時(shí)間可以存在不同發(fā)育階段和功能的亞群。這給科研工作者的研究帶來了一定的難度。隨著醫(yī)學(xué)免疫學(xué)的發(fā)展,T細(xì)胞體外分選和活化技術(shù)的誕生,為T細(xì)胞的研究帶來了新的生機(jī)。
T細(xì)胞的活化
初始T細(xì)胞的完全活化需要兩種活化信號(hào)的協(xié)同作用(即雙信號(hào)模型,two-signal model)。
第一信號(hào)由TCR(T cell receptor)識(shí)別APC(antigen presenting cell)提呈的pMHC(抗原肽-MHC分子復(fù)合物)產(chǎn)生,經(jīng)CD3轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào),CD4或CD8輔助。第一信號(hào)使T細(xì)胞初步活化,是特異性信號(hào)。
第二信號(hào)(共刺激信號(hào))則由APC或者靶細(xì)胞表面的共刺激分子與T細(xì)胞表面的共刺激分子相互作用而產(chǎn)生。共刺激分子主要包括CD28家族,CD2,ICAM等及其相應(yīng)的配體。第二信號(hào)使T細(xì)胞完全活化,分泌細(xì)胞因子和表達(dá)細(xì)胞因子受體。
T細(xì)胞在接受第一信號(hào)之后,如沒有共刺激信號(hào),T細(xì)胞活化后處于低反應(yīng)性或克隆失能狀態(tài),很快進(jìn)入凋亡。
目前常利用抗CD3的抗體提供第一信號(hào),抗CD28抗體刺激提供共刺激信號(hào),來使T細(xì)胞充分活化。
傳統(tǒng)的T細(xì)胞活化方法
目前傳統(tǒng)T細(xì)胞活化和擴(kuò)增的方法既繁瑣又復(fù)雜,不易掌控。
常用的可溶性或與包被在板上的抗體刺激T細(xì)胞也不是理想的解決方案??扇苄钥贵w一旦加入,刺激便不容易消除,而固定在板上的抗體大大減少了與T細(xì)胞接觸的機(jī)會(huì),弱化了活化效力,更重要的是,這種方法不能形成免疫突觸,僅靠單一刺激的累加,達(dá)不到理想的活化效果。
還有一種方案是使用有絲分裂原來直接誘導(dǎo)靜息T細(xì)胞的活化和增殖。常見的T細(xì)胞絲裂原有ConA(刀豆蛋白A)和PHA(植物血清素),但它們的作用是非特異性的,無法針對(duì)特定的T細(xì)胞。
BeaverBeads? Streptavidin-5μm用于T細(xì)胞分選與活化
BeaverBeads? Streptavidin-5μm為T細(xì)胞分選和活化提供了更簡(jiǎn)單的方法。 鏈霉親和素-生物素(SA-Biotin)系統(tǒng)具有極高的結(jié)合親和力,BeaverBeads? Streptavidin采用海貍專利的蛋白偶聯(lián)技術(shù)將SA共價(jià)連接于固相載體表面,可高效結(jié)合生物素化抗體。
進(jìn)行T細(xì)胞的分選與激活時(shí),搭配生物素標(biāo)記的抗CD3和CD28抗體即可。
5μm大小,可更好的模擬APC,激活T細(xì)胞。
磁性更強(qiáng),可輕松地分離細(xì)胞,且磁珠不易殘留。
BeaverBeads? Streptavidin-5μm激活T細(xì)胞的工作原理